目的 构建结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体.方法 PCR技术扩增获得rpoB基因,连接入pBluescript Ⅱ SK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法 将rpoB基因定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-rpoB,将pQE-Tri-rpoB转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染P815细胞后,以RT-PCR方法 检测mRNA表达.结果 构建了重组质粒pQE-Tri-rpoB,RT-PCR结果 证明rpoB可在P815细胞中转录.结论 成功构建了结核分支杆菌耐利福平相关基因rpoB真核表达栽体,rpoB基因可以在P815细胞中表达.
作者：王海晶；戴晓天；陈永锋
来源：四川医学 2010 年 31卷 5期
