目的:探讨胱天蛋白酶1(Caspase-1)信号通路介导的细胞焦亡在放射性肠炎中的作用.方法:X射线随机辐射处理5只小鼠建立放射性肠炎模型,另取5只未处理小鼠为对照组.将体外培养的正常人肠上皮细胞分为对照组、电离辐射(ionizing radiation,IR)组和Caspase-1 特异性抑制剂(Z-YVAD-FMK,YVAD) +IR组. YVAD+IR组用YVAD处理后辐射.采用HE染色观察肠组织病理学改变.实时荧光定量PCR检测细胞及肠组织中白细胞介素6 (interleukin-6,IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、IL-1β、IL-18 的mRNA表达. ELISA法检测小鼠血清及细胞培养基中IL-1β和IL-18的含量水平.免疫组化检测肠组织中含pyrin结构域NOD样受体家族3(NOP-like receptor family,Pyrin domain containing 3,NLRP3)、Caspase-1和含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)的表达情况.蛋白质印迹分析法检测Caspase1-p20、gasdermin D的N末端(GSDMD-N)、IL-1β、IL-18蛋白表达. Caspase-1活性检测试剂盒检测Caspase-1活性.乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测试剂盒检测培养基中LDH释放量.细胞活力测定检测细胞活性.结果:辐射后小鼠肠组织隐窝结构丧失,绒毛萎缩; IL
作者:李静;吴东明;喻叶;王越峰;许颖
来源:肿瘤预防与治疗 2019 年 32卷 9期