目的 肝脏前体细胞(WB-F344)在不同的刺激下可以分化成肝细胞或胆管细胞.本研究旨在比较外源性和内源性结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)对WB-F344细胞分化的影响.方法 重组人CTGF直接刺激WB-F344细胞,MTT法观察CTGF对WB-F344细胞活性的影响;用Western blotting方法检测CTGF对WB-F344细胞分化的影响:包括肝系标志物甲胎蛋白(α-fetoprotein,AFP)、白蛋白和胆系标志物细胞角蛋白-19(CK-19)蛋白水平的变化.构建含CTGF全长编码基因的质粒(dl6-96-CTGF)转染WB-F344细胞,用G418筛选稳定表达CTGF的WB-F344细胞株,Western blotting方法同样检测上述标志物蛋白水平的变化.结果 重组人CTGF作用于WB-F344细胞24 h后,可以轻度抑制细胞活性,但剂量关系不明显.高剂量CTGF作用于WB-F344细胞24 h后,可以明显改变WB-F344细胞表面标志物的表达:幼稚肝细胞标志物AFP的表达减少,而成熟肝细胞标志物白蛋白和胆管细胞标志物CK-19的表达均增加.成功构建CTGF全长编码基因的质粒,并用G418获得稳定转染CTGF全长质粒的WB-F344细胞株.稳定转染dl6-95-CTGF的WB-F344细胞,与转染dl6-95相比,AFP和CK-19表达均减少,白蛋白表达增加,但诱导程度没有外源性明显.结论 与内源性结缔组织生长因子相比,外源性结缔组织生

作者：杨爱婷；王萍；刘天会；丛敏；白艳锋；丛瑞；吴鹏；尤红

来源：首都医科大学学报 2010 年 31卷 3期