目的 检测α7烟碱受体(α7 nicotinic receptor,nAChR)的一个错义突变(W55G)对受体功能的影响.方法 利用双电极电压钳在非洲爪蟾卵母细胞检测了突变体W55G的功能.首先将nAChRα7亚基的cDNA克隆进入pGEMHE载体中,利用定点突变的方法构建突变体W55G.然后在体外利用T7 RNA聚合酶合成cRNA,并利用显微注射的方法将cRNA注射进入非洲爪蟾卵母细胞中.1~3d后,利用双电极电压钳检测野生型nAChRα7及其突变体W55G的功能.结果 W55G突变体对乙酰胆碱敏感性降低约6倍,但最大电流(Imax)则显著增加;对胆碱的敏感性降低了约3倍.此外,W55G突变体明显比野生nAChR有更高的时间常数,明显降低了α7烟碱受体的脱敏速率.结论 nAChRα7突变体功能的改变可能重塑突触后反应,对于脑疾病的发生可能会有较大影响.
作者:薛奋勤;薛冰
来源:首都医科大学学报 2018 年 39卷 6期