目的:构建HPV6b L1-E7嵌合基因重组减毒沙门菌,为进一步粘膜免疫奠定基础.方法:用PCR方法扩增获得HPV6b的L1-E7嵌合基因片段,TA克隆后,再将L1-E7基因克隆入pTETnir15沙门菌表达质粒.用电转化法将重组表达质粒导入鼠伤寒减毒沙门菌S.BRD509(△aroA,△aroC)中,厌氧诱导其表达,蛋白样品做SDS-PAGE凝胶电泳和western blot分析.结果:用BamHI和Sall双酶切重组表达质粒pTETnir15-6bL1E7可释放2389bp和1554bp两片段,结果与预计相符.western blot结果显示,重组沙门菌在约56KD处有明显特异蛋白条带,而对照菌则无.结论:该重组沙门菌能特异地表达HPV6b L1-E7融合蛋白,人乳头瘤病毒HPV6b L1-E7重组减毒沙门菌构建成功.
作者：孙新六；赵蔚明；于修平；卞继峰；周亚滨；贾继辉；栾怡；齐眉
来源：山东医科大学学报 2002 年 40卷 1期
