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目的:研究人乳头瘤病毒(HPV)的主要衣壳蛋白L1和主要的转化蛋白E7的融合基因在原核细胞中的表达,为研制HPV16L1E7疫苗和诊断试剂盒提供依据.方法:采用聚合酶链反应(PCR)以重组质粒pUC19L1E7为模板扩增HPV16L1E7基因片段,克隆至载体pMD18-T中,并用限制性内切酶将HPV16L1E7基因切下,克隆至原核表达质粒pQE30中,经IPTG诱导表达,再使用SDS-PAGE和蛋白印迹检测其抗原性和表达水平.结果:HPV16L1E7融合蛋白能被抗HPV16L1抗体识别,分子量为66KD,经IPTG诱导4 h后,表达的HPV16L1E7融合蛋白占菌体总蛋白量的25

作者:卢翌;卞继峰;于修平;耿昭;胡海燕;刘师莲;刘传华;王晓明;王伟

来源:山东大学学报(医学版) 2003 年 41卷 2期

知识库介绍

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作者:
卢翌;卞继峰;于修平;耿昭;胡海燕;刘师莲;刘传华;王晓明;王伟
来源:
山东大学学报(医学版) 2003 年 41卷 2期
标签:
乳头状瘤病毒,人 克隆,分子 大肠杆菌 基因表达
目的:研究人乳头瘤病毒(HPV)的主要衣壳蛋白L1和主要的转化蛋白E7的融合基因在原核细胞中的表达,为研制HPV16L1E7疫苗和诊断试剂盒提供依据.方法:采用聚合酶链反应(PCR)以重组质粒pUC19L1E7为模板扩增HPV16L1E7基因片段,克隆至载体pMD18-T中,并用限制性内切酶将HPV16L1E7基因切下,克隆至原核表达质粒pQE30中,经IPTG诱导表达,再使用SDS-PAGE和蛋白印迹检测其抗原性和表达水平.结果:HPV16L1E7融合蛋白能被抗HPV16L1抗体识别,分子量为66KD,经IPTG诱导4 h后,表达的HPV16L1E7融合蛋白占菌体总蛋白量的25