目的:构建针对人甲胎蛋白(AFP)基因siRNA表达质粒,为进一步研究AFP基因功能奠定基础.方法:选择RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,通过与线性化的pSilencer3.0-H1连接、转化大肠杆菌,扩增、纯化得到所需质粒,通过琼脂糖凝胶电泳及基因测序鉴定其分子量及插入片段的序列.结果:纯化的质粒的分子量为2.8 Kb,插入的寡核苷酸序列与设计的序列完全相符.结论:成功构建了针对AFP基因的siRNAs表达质粒.
作者:亓同钢;汪运山;王芳;吴文秀;关广聚
来源:山东大学学报(医学版) 2004 年 42卷 3期