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目的 构建针对信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的小干扰RNA( siRNA)表达载体STAT3-siRNA,研究siRNA干扰STAT3基因表达后对人胃癌细胞株HGC-27细胞增殖作用的影响.方法 设计并合成两个STAT3-siRNA片段,经脂质体介导转染HGC-27细胞,RT-PCR和Westernblot检测转染后HGC -27细胞中STAT3 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测STAT3-siRNA对HGC-27细胞增殖作用的影响.结果 酶切及测序鉴定证实STAT3-siRNA1和STAT3-siRNA 2表达载体均构建成功.RT-PCR和Western blot结果显示,转染后STAT3 mRNA和蛋白的表达量均下降,与空白对照组及si-NC转染对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01),其中以STAT3-siRNA1干扰效果更明显.MTT结果显示,转染STAT3-siRNA1后,HGC -27细胞的增殖能力明显下降,与si-NC转染对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 本研究构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制STAT3在胃癌细胞株HGC-27中的表达,并抑制胃癌细胞的生长.

作者:童书青;肖东杰;汪运山;郏雁飞;郑燕;马晓丽;戴新;桑坦

来源:山东大学学报(医学版) 2012 年 50卷 1期

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作者:
童书青;肖东杰;汪运山;郏雁飞;郑燕;马晓丽;戴新;桑坦
来源:
山东大学学报(医学版) 2012 年 50卷 1期
标签:
信号转导子和转录激活子3 RNA干扰 胃肿瘤 增殖
目的 构建针对信号转导子和转录激活子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的小干扰RNA( siRNA)表达载体STAT3-siRNA,研究siRNA干扰STAT3基因表达后对人胃癌细胞株HGC-27细胞增殖作用的影响.方法 设计并合成两个STAT3-siRNA片段,经脂质体介导转染HGC-27细胞,RT-PCR和Westernblot检测转染后HGC -27细胞中STAT3 mRNA和蛋白的表达,MTT法检测STAT3-siRNA对HGC-27细胞增殖作用的影响.结果 酶切及测序鉴定证实STAT3-siRNA1和STAT3-siRNA 2表达载体均构建成功.RT-PCR和Western blot结果显示,转染后STAT3 mRNA和蛋白的表达量均下降,与空白对照组及si-NC转染对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01),其中以STAT3-siRNA1干扰效果更明显.MTT结果显示,转染STAT3-siRNA1后,HGC -27细胞的增殖能力明显下降,与si-NC转染对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.01).结论 本研究构建的STAT3-siRNA表达载体可有效抑制STAT3在胃癌细胞株HGC-27中的表达,并抑制胃癌细胞的生长.