目的 探讨在高糖培养条件下,应用慢病毒介导的RNA干扰下调Gremlin表达对大鼠肾小球系膜细胞(RMCs)分泌纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的影响及机制.方法 构建Gremlin基因特异性的短发夹双链RNA(shRNA)慢病毒GREMl-RNAi-LV,感染RMCs后,分为5.5 mmol/L葡萄糖组、30 mmoVL葡萄糖组、30 mmol/L葡萄糖+GREM1-RNAi-LV组及30 mmol/L葡萄糖+NC-GFP-LV(感染携带绿色荧光蛋白的阴性对照慢病毒)组,分别处理48h,RT-FCR检测Gremlin mRNA表达,Western Blot检测Gremlin蛋白表达,ELISA法检测细胞上清FN、ColⅣ蛋白表达变化.结果 与5.5 mmol/L葡萄糖组相比,30 mmol/L葡萄糖组Gremlin mRNA 和蛋白水平显著升高(P均＜0.05),细胞外基质分泌FN、ColⅣ蛋白增加(P均＜0.05),而RNA干扰能下调高糖诱导的Gremlin mRNA与蛋白高表达(P＜0.05),降低细胞外基质FN、ColⅣ蛋白分泌(P＜0.05).结论 慢病毒介导的RNA干扰可明显抑制高糖诱导的Gremlin高表达,降低细胞外基质分泌,改善肾脏纤维化,可能是一个预防和治疗糖尿病肾病新型的潜在靶点.
作者：宋玉文；韩文霞；高聆；于春晓；刘丹丹；赵家军
来源：山东大学学报（医学版） 2012 年 50卷 4期
