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目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)在人近端肾小管上皮细胞(HK-2)的表达及对其转分化的影响.方法 体外培养HK-2细胞,分为HK-2组、HK-2-PHY106组(空质粒PHY106转染组)、HK-2-PHY106-HBV组(PHY106-HBV质粒转染组).用脂质体lipofectamineTM2000转染HK-2细胞.用ELISA法检测各组细胞培养上清液中HBsAg与HBeAg的含量.免疫细胞化学染色及Western blot印迹检测转染72 h后E-钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.RT-PCR法检测转染72 h后转化生长因子-1(TGF-β1)的mRNA.结果 HK-2-PHY106-HBV组细胞培养上清液中可检测到HBsAg和HBeAg的高表达;免疫细胞化学染色及Western blot印迹检测均显示HK-2-PHY106-HBV组E-cadherin表达显著下调(P<0.05),而α-SMA表达与其他两组相比明显上调(P<0.05);RT-PCR显示HK-2-PHY106-HBV组TGF-β1的mRNA表达上调(P<0.05).结论 HBV可在HK-2细胞内高效复制,并能够导致HK-2转分化,其机制可能是通过上调TGF-β1来实现的.

作者:徐慧;王义国;刘长虹;刘倩;杜娟

来源:山东大学学报(医学版) 2013 年 51卷 3期

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作者:
徐慧;王义国;刘长虹;刘倩;杜娟
来源:
山东大学学报(医学版) 2013 年 51卷 3期
标签:
乙型肝炎病毒 肾小管上皮细胞 转染 细胞表型转化 转化生长因子-β1
目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)在人近端肾小管上皮细胞(HK-2)的表达及对其转分化的影响.方法 体外培养HK-2细胞,分为HK-2组、HK-2-PHY106组(空质粒PHY106转染组)、HK-2-PHY106-HBV组(PHY106-HBV质粒转染组).用脂质体lipofectamineTM2000转染HK-2细胞.用ELISA法检测各组细胞培养上清液中HBsAg与HBeAg的含量.免疫细胞化学染色及Western blot印迹检测转染72 h后E-钙黏素(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.RT-PCR法检测转染72 h后转化生长因子-1(TGF-β1)的mRNA.结果 HK-2-PHY106-HBV组细胞培养上清液中可检测到HBsAg和HBeAg的高表达;免疫细胞化学染色及Western blot印迹检测均显示HK-2-PHY106-HBV组E-cadherin表达显著下调(P<0.05),而α-SMA表达与其他两组相比明显上调(P<0.05);RT-PCR显示HK-2-PHY106-HBV组TGF-β1的mRNA表达上调(P<0.05).结论 HBV可在HK-2细胞内高效复制,并能够导致HK-2转分化,其机制可能是通过上调TGF-β1来实现的.