目的:探讨沉默信息调节因子相关酶3(Sirt3)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响。方法体外培养 HUVECs,合成 Sirt3-siRNA 序列,Western blotting 法筛选出抑制效率最高的序列。将实验分为对照组、Sirt3-siRNA 组,Western blotting 法检测 Sirt3和细胞衰老相关蛋白 P16和 P21的表达水平,β-半乳糖苷酶染色法检测内皮细胞衰老状态,2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)法测定血管内皮细胞活性氧(ROS)的释放。结果与对照组比较,Sirt3-siRNA 组β-gal 阳性染色率明显增多,Sirt3的蛋白表达量减少,P16和 P21的蛋白表达量升高(P <0.05),ROS 释放明显增多。结论Sirt3抑制 HUVECs 衰老,其作用机制可能是通过调节 ROS 的释放而实现的。
作者:刘辉;陈桐帅;李娜;王舒健;李静媛;卜培莉
来源:山东大学学报(医学版) 2015 年 5期