目的：探讨特异性下调 Grp78表达后肝癌细胞对厄洛替尼敏感性的变化及其机制。方法通过用 siRNA技术特异性地下调肝癌细胞 SMMC-7721中 Grp78的表达并做 Western blotting 鉴定，MTT 法检测不同浓度（0、2．5、5、10、20μmol／L）厄洛替尼作用下肝癌细胞存活率的变化，流式细胞术检测细胞凋亡的变化，吖啶橙荧光染色法检测细胞凋亡的形态学变化，免疫印迹法检测 AKT、p-AKT、ERK 和 p-ERK 表达。结果转染 siRNA-Grp78后24、48、72 h 均能明显抑制 Grp78的表达，其中48 h 抑制效果最明显（P ＜0．05）。与 SMMC-7721／siControl 相比，厄洛替尼对 SMMC-7721／siRNA-Grp78细胞具有明显的增殖抑制作用和促凋亡作用，差异有统计学意义（P ＜0．05）。与 SMMC-7721／siControl 相比，厄洛替尼可明显降低 SMMC-7721／siRNA-Grp78细胞中 p-ERK 和 p-AKT的蛋白表达（P ＜0．05），但总 ERK 和 AKT 蛋白表达不受影响。结论特异性下调肝癌细胞中 Grp78的表达通过抑制 ERK 和 AKT 蛋白的磷酸化增强肝癌细胞对厄洛替尼的敏感性。
作者：宋佳；李鑫；李丹；叶丽平
来源：山东大学学报（医学版） 2015 年 6期
