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目的 探究Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用,揭示其对神经管发育的影响.方法 免疫荧光检测神经干细胞标记物——巢蛋白(Nestin)、神经元标记物——神经丝蛋白(NF)、星型胶质细胞标记物——神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞标记物——半乳糖脑苷脂(GALC)及Notch1在上述细胞中的分布.Western blotting检测神经干细胞中Notch1、NF、GFAP、GALC分别在普通分化培养基和全反式维甲酸培养基(ATRA)中1、3、5、7 d的含量.神经干细胞分为4组:将普通分化培养基设为A组,普通分化培养基+DM-SO组设为B组,普通分化培养基+DMSO+25μmol/Lγ-内分泌酶抑制剂(γSI)组设为C组,普通分化培养基+DMSO+50μmol/LγSI设为D组,Western blotting检测各组细胞中Notch1含量.结果 免疫荧光鉴定Nestin、NF、GFAP、GALC呈阳性,且在上述细胞胞膜上及胞质中有Notch1存在.普通分化培养基中Notch1在第5天较第1天明显增加,NF在第5天较第3天明显降低,GFAP与GALC含量在第5天较第1天明显下降.加入ATRA的普通分化培养基中,Notch1在第7天较第1天明显减少,而NF、GFAP、GALC在第7天较第1天明显增加.加入γSI后,Notch1胞内段NICD含量明显降低.结论 Notch1信号通路抑制神经干细胞分化,ATRA通过抑制Notch1促进神经干细胞的分

作者:徐加明;马爱华;陈娜;韩波

来源:山东大学学报(医学版) 2018 年 56卷 10期

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作者:
徐加明;马爱华;陈娜;韩波
来源:
山东大学学报(医学版) 2018 年 56卷 10期
标签:
神经管缺陷 全反式维甲酸 Notch1 神经干细胞
目的 探究Notch1在全反式维甲酸诱导的神经干细胞分化中的作用,揭示其对神经管发育的影响.方法 免疫荧光检测神经干细胞标记物——巢蛋白(Nestin)、神经元标记物——神经丝蛋白(NF)、星型胶质细胞标记物——神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及少突胶质细胞标记物——半乳糖脑苷脂(GALC)及Notch1在上述细胞中的分布.Western blotting检测神经干细胞中Notch1、NF、GFAP、GALC分别在普通分化培养基和全反式维甲酸培养基(ATRA)中1、3、5、7 d的含量.神经干细胞分为4组:将普通分化培养基设为A组,普通分化培养基+DM-SO组设为B组,普通分化培养基+DMSO+25μmol/Lγ-内分泌酶抑制剂(γSI)组设为C组,普通分化培养基+DMSO+50μmol/LγSI设为D组,Western blotting检测各组细胞中Notch1含量.结果 免疫荧光鉴定Nestin、NF、GFAP、GALC呈阳性,且在上述细胞胞膜上及胞质中有Notch1存在.普通分化培养基中Notch1在第5天较第1天明显增加,NF在第5天较第3天明显降低,GFAP与GALC含量在第5天较第1天明显下降.加入ATRA的普通分化培养基中,Notch1在第7天较第1天明显减少,而NF、GFAP、GALC在第7天较第1天明显增加.加入γSI后,Notch1胞内段NICD含量明显降低.结论 Notch1信号通路抑制神经干细胞分化,ATRA通过抑制Notch1促进神经干细胞的分