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目的 探讨NF-κB基因对胰腺癌细胞侵袭的影响及机制.方法 应用NF-κB基因小干扰RNA(siRNA)转染处理人胰腺癌PANC-1细胞,采用Western blot方法检测NF-κB蛋白水平,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞侵袭能力.收集转染48 h的癌细胞,采用包含有96个转移相关基因的芯片检测基因表达情况;根据基因芯片结果,随机抽取3个表达明显变化的基因采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)验证基因芯片结果.结果 转染组癌细胞NF-κB蛋白水平下调(P<0.05),且与时间和浓度相关.与对照组比较,转染组细胞的穿膜细胞数减少(P<0.05),且呈浓度依赖关系.基因芯片检测发现,96个基因中有11个基因表达出现明显变化,其中9个基因明显下调,包括基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-7和血管内皮生长因子(VEGF),有2个基因出现明显上调.采用荧光RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-7、VEGF基因表达,结果也发现这3个基因表达下调,且下调幅度与基因芯片结果一致.结论 NF-κB基因siRNA转染可明显抑制胰腺癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7和VEGF有关.

作者:张俊华;韦达;陈桂英;黄润生;俞力

来源:山东医药 2010 年 50卷 8期

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作者:
张俊华;韦达;陈桂英;黄润生;俞力
来源:
山东医药 2010 年 50卷 8期
标签:
胰腺肿瘤 芯片分析技术 RNA干扰 NF-κB
目的 探讨NF-κB基因对胰腺癌细胞侵袭的影响及机制.方法 应用NF-κB基因小干扰RNA(siRNA)转染处理人胰腺癌PANC-1细胞,采用Western blot方法检测NF-κB蛋白水平,采用Boyden小室模型试验检测癌细胞侵袭能力.收集转染48 h的癌细胞,采用包含有96个转移相关基因的芯片检测基因表达情况;根据基因芯片结果,随机抽取3个表达明显变化的基因采用荧光实时定量PCR(RT-PCR)验证基因芯片结果.结果 转染组癌细胞NF-κB蛋白水平下调(P<0.05),且与时间和浓度相关.与对照组比较,转染组细胞的穿膜细胞数减少(P<0.05),且呈浓度依赖关系.基因芯片检测发现,96个基因中有11个基因表达出现明显变化,其中9个基因明显下调,包括基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-7和血管内皮生长因子(VEGF),有2个基因出现明显上调.采用荧光RT-PCR方法检测MMP-2、MMP-7、VEGF基因表达,结果也发现这3个基因表达下调,且下调幅度与基因芯片结果一致.结论 NF-κB基因siRNA转染可明显抑制胰腺癌细胞的锚着不依赖性增殖和恶性侵袭,其机制可能与下调MMP-2、MMP-7和VEGF有关.