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目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)治疗视网膜新生血管性疾病的可行性及机制. 方法 将体外培养的牛眼视网膜微血管内皮细胞(BREC)分为转染组和未转染组,转染组体外转染HIF-1αASODN(根据GenBank提供的HIF-1αcDNA序列设计),两组均予125 μmol/L的CoCl2行缺氧处理.采用免疫荧光法检测细胞HIF-1α的表达; ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白水平.结果 脂质体介导的HIF-1α ASODN可成功转染BREC细胞.未转染组缺氧开始时HIF-1α有极低表达,缺氧1 h时表达量显著升高,4 h达到高峰,16 h后下降.而转染组HIF-1α的表达始终在极低水平,两组间有显著性差异(P<0.01).转染组从缺氧1 h开始VEGF表达明显低于未转染组(P<0.01).结论 脂质体介导的 HIF-1α ASODN能有效抑制BREC细胞HIF-1α的表达,从而降低细胞VEGF的表达.

作者:付文琴;邓爱军;杜玮;臧萍

来源:山东医药 2010 年 50卷 31期

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作者:
付文琴;邓爱军;杜玮;臧萍
来源:
山东医药 2010 年 50卷 31期
标签:
寡核苷酸类,反义 视网膜新生血管 血管内皮生长因子
目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸(ASODN)治疗视网膜新生血管性疾病的可行性及机制. 方法 将体外培养的牛眼视网膜微血管内皮细胞(BREC)分为转染组和未转染组,转染组体外转染HIF-1αASODN(根据GenBank提供的HIF-1αcDNA序列设计),两组均予125 μmol/L的CoCl2行缺氧处理.采用免疫荧光法检测细胞HIF-1α的表达; ELISA法检测细胞培养上清液中VEGF蛋白水平.结果 脂质体介导的HIF-1α ASODN可成功转染BREC细胞.未转染组缺氧开始时HIF-1α有极低表达,缺氧1 h时表达量显著升高,4 h达到高峰,16 h后下降.而转染组HIF-1α的表达始终在极低水平,两组间有显著性差异(P<0.01).转染组从缺氧1 h开始VEGF表达明显低于未转染组(P<0.01).结论 脂质体介导的 HIF-1α ASODN能有效抑制BREC细胞HIF-1α的表达,从而降低细胞VEGF的表达.