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目的 筛选介导表皮生长因子受体(EGFR)小干扰RNA( siRNA)转染肝癌HepG2细胞的试剂,并优化转染条件.方法 设计靶向EGFR的特异性siRNA,分别用Lipofectamine 2000、siPORT Amine、ICAFectin 442、N-TER nanoparticle、X-tremeGENE、polyMagnetofection、combiMAGnetofection介导转染肝癌HepG2细胞48、72 h.实时定量RT-PCR检测HepG2细胞的EGFR mRNA,计算敲除EGFR mRNA率,据此筛选出最佳转染试剂,继续进行不同试剂用量、不同siRNA浓度、正反向转染的对比.测算转染后细胞存活率及转染率.结果 Lipofectamine 2000、siPORT Amine及 combiMAGnetofection介导转染72 h后,HepG2细胞的EGFR mRNA敲除率均超过65

作者:陈罡;党裔武;罗殿中

来源:山东医药 2011 年 51卷 18期

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作者:
陈罡;党裔武;罗殿中
来源:
山东医药 2011 年 51卷 18期
标签:
RNA干扰 表皮生长因子受体 小干扰RNA 基因转染介质 肝癌细胞
目的 筛选介导表皮生长因子受体(EGFR)小干扰RNA( siRNA)转染肝癌HepG2细胞的试剂,并优化转染条件.方法 设计靶向EGFR的特异性siRNA,分别用Lipofectamine 2000、siPORT Amine、ICAFectin 442、N-TER nanoparticle、X-tremeGENE、polyMagnetofection、combiMAGnetofection介导转染肝癌HepG2细胞48、72 h.实时定量RT-PCR检测HepG2细胞的EGFR mRNA,计算敲除EGFR mRNA率,据此筛选出最佳转染试剂,继续进行不同试剂用量、不同siRNA浓度、正反向转染的对比.测算转染后细胞存活率及转染率.结果 Lipofectamine 2000、siPORT Amine及 combiMAGnetofection介导转染72 h后,HepG2细胞的EGFR mRNA敲除率均超过65