目的 建立膝关节患者关节软骨细胞体外培养体系,为其相关研究奠定基础.方法 取15例人工膝关节置换术患者的软骨组织,采用组织原代培养法获得膝关节软骨细胞,传代培养.倒置相差显微镜观察细胞形态,绘制生长曲线,苏木素伊红染色、甲苯胺蓝染色及Ⅰ型胶原、Ⅱ型胶原、X型胶原、MMP-1、MMP-13、TNF-α免疫荧光染色对细胞进行鉴定.结果 原代培养的人软骨细胞大量呈梭形、短梭形,少部分呈多角形,传代3次后出现树突生长细胞.形态学、免疫荧光染色显示细胞培养3代以内可保持表型稳定,多数软骨细胞维持梭形、短梭形,核为圆形或椭圆形.苏木精伊红阳性染色为细胞核呈紫蓝色,软骨细胞基质呈红色,周围胞浆呈紫红色、阿利新蓝染色后,胞质和胞膜呈深蓝色、Ⅱ型胶原免疫荧光染色可见胞质和胞膜清晰绿色荧光,细胞核区域未见明显绿色荧光.结论 成功建立了的软骨细胞分离、培养体系,且3代以内细胞生长良好.
作者：孟祥奇；黄桂成
来源：山东医药 2012 年 52卷 15期
