目的 构建由细菌人工染色体(BAC)携带的表达FGF18-绿色荧光蛋白(GFP)的重组体,用于生产转基因小鼠,筛选表达FGF18的特定细胞.方法 分别克隆FGF18基因启动子区域的5’同源臂和3’同源臂,插入到pBS-GFP-kan质粒的左右两段,构建携带FGF18同源臂的质粒.提取含有FGF18基因全长的bMQ-282D14 BAC,转化到SW105细菌中并筛选阳性克隆,之后再将带有FGF18基因同源臂的pBS-GFP-Kan质粒转化到该细菌内,在42℃实现基因同源重组,将GFP基因插入到FGF18基因的启动子区.结果 经过氯霉素与卡那霉素的正负筛选,选出FGF18-GFP阳性的菌株,提取出构建好的BAC.结论 成功构建了BAC携带的FGF18-GFP重组体,可用于转基因小鼠生产.
作者：孙德旭；秦苏萍；王晓天；李小翠；刘志强
来源：山东医药 2013 年 53卷 19期
