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目的 从人源噬菌体抗体文库中筛选抗人结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv),原核表达并鉴定其活性.方法 以重组人源CTGF(rhCTGF)为靶标,对人源噬菌体抗体文库进行筛选;用Phage-ELISA筛选阳性克隆并进行原核表达、纯化,获得了高纯度的ScFv蛋白,通过ELISA和Millicell迁移实验鉴定其活性.结果 经过3轮筛选,获得1株特异性抗人CTGF ScFv 1C5,ELISA显示1C5能与rhCTGF特异性结合;在Millicell迁移实验中,1C5能抑制CTGF的生物学功能,具有中和活性.结论 成功筛选到1株抗人CTGF的ScFv,有望在CTGF相关疾病的治疗上发挥作用.

作者:周云;包林;金秋;张黎;蔡雪婷;卢悟广;曹鹏;焦永军;张建平

来源:山东医药 2013 年 53卷 20期

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作者:
周云;包林;金秋;张黎;蔡雪婷;卢悟广;曹鹏;焦永军;张建平
来源:
山东医药 2013 年 53卷 20期
标签:
结缔组织生长因子 噬菌体展示技术 单链抗体 靶向治疗 connective tissue growth factor phage display technology single-chain antibodies targeted therapy
目的 从人源噬菌体抗体文库中筛选抗人结缔组织生长因子(CTGF)单链抗体(ScFv),原核表达并鉴定其活性.方法 以重组人源CTGF(rhCTGF)为靶标,对人源噬菌体抗体文库进行筛选;用Phage-ELISA筛选阳性克隆并进行原核表达、纯化,获得了高纯度的ScFv蛋白,通过ELISA和Millicell迁移实验鉴定其活性.结果 经过3轮筛选,获得1株特异性抗人CTGF ScFv 1C5,ELISA显示1C5能与rhCTGF特异性结合;在Millicell迁移实验中,1C5能抑制CTGF的生物学功能,具有中和活性.结论 成功筛选到1株抗人CTGF的ScFv,有望在CTGF相关疾病的治疗上发挥作用.