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目的:探讨核细胞核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在川崎病发生、发展中的作用及其机制。方法研究对象为川崎病患儿21例(川崎病组)、呼吸道感染患者18例(阳性对照组)、正常查体者17例(正常对照组)。采用密度梯度离心法无菌分离各组外周血PBMCs自然培养,采用RT-PCR法和Westen blot法测定细胞中NF-κB p65 mRNA和蛋白,采用ELISA方法测定细胞上清液中MMP-9蛋白。将川崎病组外周血PBMCs体外培养并分为川崎病1、2、3组,川崎病1组继续自然培养,川崎病2组加入终浓度为20 nmol/L的NF-κB激动剂PMA,川崎病3组同时加入PMA(浓度同上)及终浓度为100μmol/L的NF-κB抑制剂 PDTC,孵育2 h后收集上清液和细胞,分别采用RT-PCR法和Westen blot法测定NF-κB p65 mRNA和蛋白表达,采用ELISA法测定细胞上清液中MMP-9蛋白水平。结果川崎病组PBMCs中NF-κB p65 mRNA、蛋白及上清液MMP-9表达均高于阳性对照组和健康对照组( P均<0.05)。川崎病1、3组PBMCs中NF-κB p65蛋白及上清液中MMP-9表达水平均低于川崎病2组(P均<0.05)。结论急性期川崎病患儿外周血PBMCs 中NF-κB和细胞上清液中MMP-9表达增强;二者可能参与了川崎病的发生发展过程。。

作者:谈诚;韩勍;朱纯亮;李喆倩;刘丽莎

来源:山东医药 2015 年 6期

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作者:
谈诚;韩勍;朱纯亮;李喆倩;刘丽莎
来源:
山东医药 2015 年 6期
标签:
川崎病 核因子-κB 基质金属蛋白酶9 外周血单个核细胞 Kawasaki disease nuclear factor-kappaB matrix metalloproteases 9 peripheral blood mononuclear cells
目的:探讨核细胞核因子-κB(NF-κB)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)在川崎病发生、发展中的作用及其机制。方法研究对象为川崎病患儿21例(川崎病组)、呼吸道感染患者18例(阳性对照组)、正常查体者17例(正常对照组)。采用密度梯度离心法无菌分离各组外周血PBMCs自然培养,采用RT-PCR法和Westen blot法测定细胞中NF-κB p65 mRNA和蛋白,采用ELISA方法测定细胞上清液中MMP-9蛋白。将川崎病组外周血PBMCs体外培养并分为川崎病1、2、3组,川崎病1组继续自然培养,川崎病2组加入终浓度为20 nmol/L的NF-κB激动剂PMA,川崎病3组同时加入PMA(浓度同上)及终浓度为100μmol/L的NF-κB抑制剂 PDTC,孵育2 h后收集上清液和细胞,分别采用RT-PCR法和Westen blot法测定NF-κB p65 mRNA和蛋白表达,采用ELISA法测定细胞上清液中MMP-9蛋白水平。结果川崎病组PBMCs中NF-κB p65 mRNA、蛋白及上清液MMP-9表达均高于阳性对照组和健康对照组( P均<0.05)。川崎病1、3组PBMCs中NF-κB p65蛋白及上清液中MMP-9表达水平均低于川崎病2组(P均<0.05)。结论急性期川崎病患儿外周血PBMCs 中NF-κB和细胞上清液中MMP-9表达增强;二者可能参与了川崎病的发生发展过程。。