目的：探讨膜结合型巨噬细胞集落刺激因子（ mM-CSF）及其剪切体（ mM-CSF-Δ）对淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖的抑制作用。方法采用Overlap PCR法构建带有mM-CSF的真核表达质粒pTARGET-mM-CSF，再进一步构建胞内区截短30个氨基酸的表达质粒pTARGET-mM-CSF-Δ，并进行PCR及DNA双向测序鉴定。将空载体pTARGET、pTARGET-mM-CSF、pTARGET-mM-CSF-Δ质粒分别转染Ramos细胞，经G418筛选稳定表达细胞株，并用RT-PCR、Western blotting进行鉴定；MTT法检测细胞增殖，流式细胞仪检测细胞周期。结果成功构建了mM-CSF和 mM-CSF-Δ的真核表达载体，获得了稳定转染细胞株 Ramos-V、Ramos-M 和 Ramos-Δ。 Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞增殖能力的OD值分别为0．413±0．014、0．384±0．019、0．463±0．037，Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较，Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与Ramos-V细胞比较，P＜0．05或＜0．01。 Ramos-M、Ramos-Δ、Ramos-V细胞处于G0／G1期的比例分别为41．54％±1．22％、45．60％±1．09％、39．20％±1．53％，Ramos-M细胞与Ramos-Δ细胞比较， Ramos-M、Ramos-Δ细胞分别与 Ramos-V 细胞比较， P ＜0．05或＜0．01。结论 mM-CSF、mM-CSF-Δ均能抑制淋巴细胞白血病Ramos细胞增殖，且后者抑制作用

作者：马翠花；种靖慧；廖金凤；林永敏；卫佳；郑国光

来源：山东医药 2015 年 19期