目的：探讨SIRT1-shRNA慢病毒表达载体转染对人非小细胞肺癌A549细胞SIRT1基因表达、黏附能力、迁移能力及E-cadherin、β-catenin mRNA和蛋白表达量的影响。方法构建SIRT1-shRNA慢病毒表达载体，并用其转染A549细胞。对照组转染277空载体，观察组转染277-iSIRT1。用RT-PCR法检测两组细胞SIRT1 mRNA表达，用细胞黏附实验检测两组细胞黏附能力，划痕实验检测细胞迁移能力，RT-PCR法检测细胞内E-cadherin、β-catenin mRNA表达，Western blot法检测细胞内E-cadherin、β-catenin蛋白表达。结果观察组、对照组A549细胞SIRT1 mRNA分别为0．48±0．26、1．00±0．00（P＜0．05），黏附细胞数分别为（196．6±9．8）、（125．6±9．8）个（P＜0．05），细胞相对迁移率分别为65％±2％、100％±0（P＜0．05），E-cadherin蛋白表达量分别为1．27±0．16、1．00±0．00（P＜0．05），β-catenin蛋白表达量分别为1．24±0．13、1．00±0．00（P＜0．05）。结论 SIRT1-shRNA慢病毒表达载体可明显下调A549细胞SIRT1表达，提高其下游基因E-cadherin、β-catenin mRNA和蛋白表达量，增强细胞黏附能力，降低细胞迁移能力。
作者：孙硕文；朱之燕；杜玮；王豪；刘喆
来源：山东医药 2015 年 22期
