目的:探讨胃动蛋白1(GKN1)在胃癌转移中的作用,及其是否与基质金属蛋白酶(MMP)家族及NF-κB信号通路有关。方法取对数生长期的人胃癌细胞MGC803、MKN-45和非肿瘤性上皮细胞HFE-145,采用实时荧光定量PCR法检测细胞GKN1 mRNA表达。将对数生长期的MKN-45细胞随机分为转染组、空载体组、对照组,转染组转染GKN1表达载体,空载体组转染空载体,对照组不予处理。采用MTT法检测各组转染后连续5 d的细胞增殖活性,细胞划痕试验检测划痕宽度,Western blotting 法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、NF-κB p65蛋白表达。结果人胃癌细胞MGC803、MKN-45中GKN1 mRNA相对表达量分别为0.172±0.024、0.231±0.031,非肿瘤性上皮细胞HFE-145中GKN1 mRNA相对表达量为1.024±0.264;两种人胃癌细胞GKN1 mRNA相对表达量均低于HFE-145细胞,P均<0.05。培养第1、2天,转染组、空载体组、对照组细胞增殖活性比较,P均>0.05;培养第3、4、5天,转染组增殖活性均低于空载体组、对照组,P均<0.05。转染组划痕试验后48、72 h的划痕宽度均高于空载体组、对照组,P均<0.05。转染组MMP-2、MMP-9、NF-κB p65蛋白相对表达量均低于空载体组、对照组,P均<0.05。空载体组、对照组上述指标比较,P均>0.05。
作者:齐京鹏;史阿娉;丰帆;任贵;张洪伟
来源:山东医药 2015 年 32期