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目的:观察Cox-2选择性抑制剂NS-398对人结肠癌细胞株HCT-8增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的 HCT-8细胞,加入终浓度为0、10、20、40、80、160μmol/L 的 NS-398进行干预,采用 CCK-8法测定 NS-398对人结肠癌 HCT-8细胞的抑制率;采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33342染色观察凋亡细胞核形态;0、40、80、160μmol/L 的 NS-398作用癌细胞24 h 后,免疫细胞化学法检测癌细胞 Cox-2、Survivin蛋白表达;ELISA 法检测 NS-398作用前后培养液中 PGE2含量;酶标仪检测 Caspase-3/7的活性。结果NS-398作用后结肠癌 HCT-8细胞增殖受到抑制,抑制作用呈时间、浓度依赖性,40、80、160μmol/L 的 NS-398作用后细胞生长抑制率比较差异有统计学意义(P 均<0.05);FCM结果显示,40、80、160μmol/L 的 NS-398作用24 h 后,细胞凋亡率分别为12%、17%及26%,且呈剂量依赖性;Hoechst 33342染色显示,随着 NS-398浓度的增加,核呈致密浓染状,荧光强度增加,细胞凋亡增加。40、80、160μmol/L 的 NS-398作用24 h 后,癌细胞 Cox-2、Survivin 蛋白表达较0μmol/L 的 NS-398显著减少,细胞培养上清液中 PGE2含量较0μmol/L 的 NS-398明显下降;同时随 NS-398浓度的增加,C

作者:张晓贤;孙剑经;刘华;罗强;张林西

来源:山东医药 2016 年 56卷 25期

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作者:
张晓贤;孙剑经;刘华;罗强;张林西
来源:
山东医药 2016 年 56卷 25期
标签:
结肠癌 Cox-2选择性抑制剂 细胞凋亡 Survivin蛋白 Caspase-3/7 colorectal carcinoma cyclooxygenase-2 selective inhibitor apoptosis Survivin protein Caspase-3 /7
目的:观察Cox-2选择性抑制剂NS-398对人结肠癌细胞株HCT-8增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法取对数生长期的 HCT-8细胞,加入终浓度为0、10、20、40、80、160μmol/L 的 NS-398进行干预,采用 CCK-8法测定 NS-398对人结肠癌 HCT-8细胞的抑制率;采用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst 33342染色观察凋亡细胞核形态;0、40、80、160μmol/L 的 NS-398作用癌细胞24 h 后,免疫细胞化学法检测癌细胞 Cox-2、Survivin蛋白表达;ELISA 法检测 NS-398作用前后培养液中 PGE2含量;酶标仪检测 Caspase-3/7的活性。结果NS-398作用后结肠癌 HCT-8细胞增殖受到抑制,抑制作用呈时间、浓度依赖性,40、80、160μmol/L 的 NS-398作用后细胞生长抑制率比较差异有统计学意义(P 均<0.05);FCM结果显示,40、80、160μmol/L 的 NS-398作用24 h 后,细胞凋亡率分别为12%、17%及26%,且呈剂量依赖性;Hoechst 33342染色显示,随着 NS-398浓度的增加,核呈致密浓染状,荧光强度增加,细胞凋亡增加。40、80、160μmol/L 的 NS-398作用24 h 后,癌细胞 Cox-2、Survivin 蛋白表达较0μmol/L 的 NS-398显著减少,细胞培养上清液中 PGE2含量较0μmol/L 的 NS-398明显下降;同时随 NS-398浓度的增加,C