目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向成骨细胞分化的影响,并探讨其最佳作用浓度.方法 采用体外全血贴壁法培养兔BMSCs,进行表面抗原(CD29、CD44、CD45,采用流式细胞术)及成软骨(HE染色和阿尔新蓝染色)、成骨[茜素红染色及碱性磷酸酶(ALP)染色]分化潜能鉴定.取第2代BMSCs,加入含0、1、5、10、50、100 ng/mL bFGF的成骨诱导液,分别于培养第4、7、10、14天采用PNP比色法检测ALP表达,采用放射免疫分析法检测骨钙素(OC)表达.结果 细胞表面抗原CD29阳性表达率为92.23％,CD44阳性表达率为80.01％,CD45阳性表达率为1.91％;HE染色见细胞形态为多角形或多边形,有多个凸起,核周细胞质内可见黑色颗粒,阿尔新蓝染色可见细胞间大量天蓝色物质弥漫分布;茜素红染色可见大量红色钙结节,ALP染色可见细胞质中出现棕褐色的颗粒和块状沉淀;证实分离培养的细胞为BMSCs,并具有成软骨和成骨分化潜能.随着作用时间的延长,BMSCs经不同浓度bFGF作用后ALP及OC表达均呈升高趋势.相同作用时间下,BMSCs经50 ng/mL bFGF作用后ALP及OC表达均高于0、1、5、10、100 ng/mL bFGF作用后(P均＜0.01).结论 bFGF能促进BMSCs向成骨细胞分化,并呈时间依赖性;其最佳作用浓度为50 ng/mL.
作者：户小伟；李巍；韦达隆；劳山
来源：山东医药 2016 年 56卷 48期
