目的 对头颈部鳞状细胞癌中高表达的基质金属蛋白酶(MMP)基因(包括MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12 和 MMP13)具有激活作用的人类膜蛋白基因进行筛选.方法 构建上述7个备选MMP启动子报告基因质粒.用豆蔻酸佛波酰乙酯(PMA,一种蛋白激酶C激活剂)刺激7个备选MMP启动子报告基因质粒.用双荧光素酶检测系统检测各备选MMP启动子报告基因质粒PMA刺激前的活性及PMA刺激后的活性,以后者除以前者得出各备选MMP启动子报告基因质粒的相对荧光素酶活性值(RLA),RLA最大者选定为MMP启动子报告基因质粒.用人类膜蛋白基因质粒库中的722种质粒依次刺激MMP启动子报告基因质粒,刺激前后MMP启动子报告基因质粒RLA均数超过10确定为对MMP启动子报告基因质粒活性有明显激活作用的人类膜蛋白基因质粒.将筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第二轮筛选,第二轮筛选出的人类膜蛋白基因质粒以相同方法进行第三轮筛选,最终确定对头颈部鳞状细胞癌中高表达的MMP有激活作用的人类膜蛋白基因.结果 PMA刺激后MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、MMP10、MMP12、MMP13启动子报告基因质粒的RLA分别为4.53±0.72、1.47±0.28、23.28±1.96、2.37±0.46、8.81±1.35、2.15±0.51、3.47±0.99.MMP3启动子报告基因质粒的RLA明显高于其他MMP启动子
作者:许洪波;米光熙;黄俊伟;刘泽阳;尹高菲;黄志刚
来源:山东医药 2017 年 57卷 23期