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目的 对比观察小干扰RNA(siRNA)和反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果.方法 将培养的大鼠肝星状细胞株HSC-T6随机分为siRNA组和ASODN组,两组又分别分为A、B、C、D各4个亚组;siRNA组和ASODN组中的A亚组不转染质粒, C、D、B亚组分别采用siRNA、ASODN技术转染大鼠RhoA特异性Rat1 、Rat2质粒及HK-A阴性对照质粒.转染48 h取各组细胞,以RT-PCR技术检测细胞中的RhoA、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) mRNA,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中的透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN).结果 siRNA组与ASODN组中RhoA、Col Ⅰ mRNA均以C亚组表达量最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组RhoA、Col Ⅰ mRNA相对表达量低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).siRNA组与ASODN组细胞上清液HA、LN水平均以C亚组最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组细胞上清液HA、LN水平低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 siRNA和ASODN均可抑制大鼠HSC-T6细胞的RhoA表达,但siRNA下Rat1质粒所介导的 RNA干扰技术相

作者:张玉峰;叶坤英;钟丹

来源:山东医药 2017 年 57卷 34期

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张玉峰;叶坤英;钟丹
来源:
山东医药 2017 年 57卷 34期
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小干扰RNA 反义寡核苷酸 RhoA 透明质酸 Ⅰ型胶原 层粘连蛋白 肝星状细胞 small interfering RNA antisense oligonucleotide RhoA hyaluronic acid collagenⅠ laminin hepatic stellate cells
目的 对比观察小干扰RNA(siRNA)和反义寡核苷酸(ASODN)技术抑制肝星状细胞RhoA表达的效果.方法 将培养的大鼠肝星状细胞株HSC-T6随机分为siRNA组和ASODN组,两组又分别分为A、B、C、D各4个亚组;siRNA组和ASODN组中的A亚组不转染质粒, C、D、B亚组分别采用siRNA、ASODN技术转染大鼠RhoA特异性Rat1 、Rat2质粒及HK-A阴性对照质粒.转染48 h取各组细胞,以RT-PCR技术检测细胞中的RhoA、Ⅰ型胶原(Col Ⅰ) mRNA,酶联免疫吸附法检测细胞上清液中的透明质酸(HA)及层粘连蛋白(LN).结果 siRNA组与ASODN组中RhoA、Col Ⅰ mRNA均以C亚组表达量最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组RhoA、Col Ⅰ mRNA相对表达量低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).siRNA组与ASODN组细胞上清液HA、LN水平均以C亚组最低,组内A、C亚组比较差异有统计学意义(P均<0.05),组内其余亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05);siRNA组C亚组细胞上清液HA、LN水平低于ASODN组(P均<0.05),两组A、B、D同亚组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).结论 siRNA和ASODN均可抑制大鼠HSC-T6细胞的RhoA表达,但siRNA下Rat1质粒所介导的 RNA干扰技术相