目的 探讨miR-34a-5p对胃腺癌细胞凋亡的影响及其作用机制.方法 ①采用生物信息学技术预测Bcl-2是否为miR-34a-5p的靶基因.②体外培养人正常胃黏膜上皮细胞RGM-1、人胃腺癌细胞SGC7901,采用qRT-PCR法检测两种细胞miR-34a-5p、Bcl-2 mRNA表达.③将SGC7901细胞随机分为观察组和对照组,观察组转染miR-34a-5p mimic质粒,对照组转染scramble质粒.转染48 h,采用qRT-PCR法、Western blotting法检测Bcl-2 mRNA和蛋白表达.④将SGC7901细胞随机分为阴性对照组、Bcl-2 WT组、Bcl-2 MT组,阴性对照组转染miR-34a-5p mimic和pRL-TK,Bcl-2 WT组转染miR-34a-5p mimic、Bcl-2野生型载体和pRL-TK,Bcl-2 MT组转染miR-34a-5p mimic、Bcl-2突变型载体和pRL-TK.转染48h,采用双荧光素酶报告基因实验检测各组相对荧光素酶活性.⑤将SGC7901细胞随机分为阴性对照组、miR-34a-5p mimic组、pcDNA3.1-Bcl-2组、miR-34a-5p mimic+ pcDNA3.1-Bcl-2组,阴性对照组转染scramble+ pcDNA3.1-空载体,miR-34a-5p mimic组转染miR-34a-5p mimic,pcDNA3.1-Bcl-2组转染pcDNA3.1-Bcl-2,miR-34a-5p mimic+ pcDNA3.1-Bcl-2组转染miR-34a-5p mimic+ pcDNA3.1-Bcl-2.转染48 h,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.结果 ①Bcl-2为miR-34a-5p的靶基因.②SGC79

作者：朱金峰；曾薇；王海江

来源：山东医药 2017 年 57卷 36期