目的 探讨沉默钙连蛋白(Calnexin)对肾母细胞瘤细胞凋亡及内质网应激、JNK信号通路的影响.方法 将肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞分为对照组、空载体组、实验组.对照组正常培养不转染.空载体组转染空白质粒,实验组转染Calnexin shRNA.转染24 h后全部更换为正常培养液继续培养48 h.采用实时荧光定量PCR法检测各组Calnexin mRNA表达,TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI),Western blotting法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、需肌醇酶1(IRE1)、肿瘤坏死因子受体相关因子2(TRAF2)、凋亡信号调节激酶1(ASK1)、磷酸化凋亡信号调节激酶1(p-ASK1)、c-Jun N末端激酶(JNK)及磷酸化c-Jun N末端激酶(p-JNK)蛋白相对表达量.结果 Calnexin mRNA相对表达量:实验组、空载体组、对照组分别为0.28±0.01、1.01±0.06、1.00±0.08;实验组低于空载体组和对照组(P<0.05),但空载体组与对照组比较无统计学差异(P>0.05).AI:实验组、空载体组、对照组分别为32.86±3.72、5.46±0.68、5.26±0.17;实验组高于空载体组和对照组(P<0.05),但空载体组与对照组比较无统计学差异(P>0.05).GRP78、IRE1、TRAF2、ASK1、p-ASK1、JNK及p-JNK蛋白相对表达量:实验组高于空载体组和对照组(P均<0.05),但空载体组与对照组比较无统计学差异(P均>0.05).结论 沉默Calnexin
作者:孙为增;林国雄;林海
来源:山东医药 2017 年 57卷 40期