目的 构建融合蛋白SMP30-IP10真核表达质粒,并初步探究其对肝癌细胞株SK-hep1迁移、侵袭及增殖的影响.方法 将肝癌细胞株SK-hep1分为两组,实验组转染pIRES-SMP30-IP10质粒,对照组转染空质粒pIRES;通过重叠PCR方法构建pIRES-SMP30-IP10真核表达质粒;采用脂质体转染法转染肝癌细胞SK-hep1;Western blot-ting法检测蛋白表达;Transwell法检测细胞的迁移和侵袭能力;CCK8法检测细胞增殖能力.结果 通过PCR、双酶切及测序鉴定证实成功构建了真核表达质粒pIRES-SMP30-IP10,并在肝癌细胞株SK-hep1中正确表达.与对照组相比,实验组细胞迁移、侵袭能力下降(P均<0.05),但细胞形态及增殖能力均差异无统计学意义(P均>0.05).结论 成功构建了融合蛋白SMP30-IP10真核表达质粒,融合蛋白SMP30-IP10可抑制肝癌细胞的迁移、侵袭能力,但对细胞的增殖能力影响不明显.
作者:谢美玉;郭顺利;宾晓芸;石明霞;陈安宁;陈思宇;周素芳
来源:山东医药 2017 年 57卷 41期