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目的 观察羟基酪醇对过氧化氢(H2O2)损伤的神经细胞株PC12凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 将第5代对数期PC12细胞分为对照组、H 2 O2组、观察组进行培养;对照组不加H2O2和羟基酪醇,H 2 O2组加H2 O2,观察组加H 2 O2及羟基酪醇.细胞培养24 h,采用CCK8比色法测算各组细胞存活率,同时测定各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)和ROS,Hoechst 33258荧光染色法测算细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测各组细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA,免疫印迹试验检测各组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白,酶联免疫吸附测定法测定各组IL-1β 和TNF-α.结果 与对照组相比,H 2 O2组细胞存活率降低(P<0.05)、细胞凋亡率上升(P<0.05);与H 2 O2组相比,观察组细胞存活率上升(P<0.05)、细胞凋亡率降低(P<0.05).与对照组相比,H 2 O2组LDH释放率和ROS水平升高(P均<0.05);与H 2 O2组相比,观察组LDH释放率和ROS水平降低(P均<0.05).与对照组相比,H 2 O2组Bax mRNA相对表达量升高(P<0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量降低(P<0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量升高(P<0.05);与H 2 O2组相比,观察组Bax mRNA相对表达量降低(P<0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量升高(P<0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量降低(P<0.05).与对照组相比,H 2 O2组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白表达

作者:刘旭东;李静;柳太云

来源:山东医药 2017 年 57卷 43期

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刘旭东;李静;柳太云
来源:
山东医药 2017 年 57卷 43期
标签:
羟基酪醇 PC12细胞 神经细胞 嗜铬细胞瘤 细胞凋亡 凋亡基因 乳酸脱氢酶 活性氧簇 炎症因子
目的 观察羟基酪醇对过氧化氢(H2O2)损伤的神经细胞株PC12凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 将第5代对数期PC12细胞分为对照组、H 2 O2组、观察组进行培养;对照组不加H2O2和羟基酪醇,H 2 O2组加H2 O2,观察组加H 2 O2及羟基酪醇.细胞培养24 h,采用CCK8比色法测算各组细胞存活率,同时测定各组细胞乳酸脱氢酶(LDH)和ROS,Hoechst 33258荧光染色法测算细胞凋亡率,实时荧光定量PCR检测各组细胞Bax、Bcl-2、Caspase-3 mRNA,免疫印迹试验检测各组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白,酶联免疫吸附测定法测定各组IL-1β 和TNF-α.结果 与对照组相比,H 2 O2组细胞存活率降低(P<0.05)、细胞凋亡率上升(P<0.05);与H 2 O2组相比,观察组细胞存活率上升(P<0.05)、细胞凋亡率降低(P<0.05).与对照组相比,H 2 O2组LDH释放率和ROS水平升高(P均<0.05);与H 2 O2组相比,观察组LDH释放率和ROS水平降低(P均<0.05).与对照组相比,H 2 O2组Bax mRNA相对表达量升高(P<0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量降低(P<0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量升高(P<0.05);与H 2 O2组相比,观察组Bax mRNA相对表达量降低(P<0.05)、Bcl-2 mRNA相对表达量升高(P<0.05)、Caspase-3 mRNA相对表达量降低(P<0.05).与对照组相比,H 2 O2组NF-κB、p-NF-κB Ser536蛋白表达