目的 观察特异性丝/苏氨酸蛋白(Aurora)激酶抑制剂AT9283对乳腺癌原代细胞增殖、细胞周期、自噬、凋亡的影响,并探讨其可能作用机制.方法 取对数生长期乳腺癌原代细胞,加入AT9283,培养48 h免疫荧光染色后镜下观察乳腺癌原代细胞细胞核和纺锤体变化.取对数生长期乳腺癌原代细胞,分为实验组(1、2、3、4、5组)和对照组,实验组分别加入2 mL的0.001、0.01、0.1、1、10 μmol/L AT9283,对照组不做任何处理,MTT法测算实验组细胞增殖抑制率,流式细胞仪分析各组细胞周期,Western Blotting法检测各组Aurora A、组蛋白H3(Histone H3)、p-AuroraA、p-Histone H3、p21、p53、Bcl-2、Bax蛋白.另取适量乳腺癌原代细胞,分为A、B、C、D四组,A、B、C组分别加入0.1、1、10 μmol/L的AT9283,D组不做任何处理,共培养24 h.采用吖啶橙染色法观察各组细胞自噬情况,采用流式细胞术观察各组细胞凋亡情况.结果 未处理乳腺癌原代细胞的细胞核和纺锤体没有改变,加入AT9283处理的乳腺癌原代细胞镜下可见细胞核形态改变,出现核分叶现象,产生多核细胞,纺锤体由双极变为单极,出现纺锤体紊乱.与对照组比较,培养24、48 h时1、2、3、4、5组细胞增殖抑制率均升高,且呈浓度依赖性(P均<0.05).与对照组比较,各组G2/M期细胞所占比例升高,G0/G1、S
作者:张月;孙光源;姜伟华;孙健;范敬静;宋文丽;信国峰;张志生
来源:山东医药 2018 年 58卷 15期