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目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对乙肝病毒复制的体外抑制作用,并探讨其机制.方法 取对数生长期HepG2.2.15细胞,分为A、B、C组.A组、B组分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG,对照组不作任何处理.培养24h收集细胞上清,检测各组乙肝病毒e抗原和s抗原,采用real-time PCR法检测各组乙肝病毒DNA.取对数生长期HepG2.2.15细胞,接种于6 cm培养皿,将细胞分为1、2、3、4组.1、2组分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG,3组加入200 nmol/L的Rapamycin,4组不做任何处理,培养24h.采用Westernblotting法检测各组细胞自噬标记蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、自噬降解相关蛋白p62/β-actin.取对数生长期HepG2.2.15细胞接种于12孔板,将细胞分为空白组、对照组、自噬抑制组(又分为3-MA组和CQ组).其中,对照组、3-MA组、CQ组又各自分为2组.对照组分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG处理.3-MA组和CQ组分别先用终浓度为10 mmol/L的3-MA和50 μmol/L的CQ预处理半小时,再分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG.空白组不作任何处理.24h后收集各组细胞上清,检测各组乙肝病毒e抗原、s抗原和乙肝病毒DNA.结果 与C组比较,培养24h时A、B组乙肝病毒e抗原、s抗原相对量及均乙肝病毒DNA的相对表达量降低(P均<0.01).与4组比较,1、2、3组LC3

作者:吴绍凤;郑荣荣;司凤磊;刘宏博;郭文聪;李宁;侯琳

来源:山东医药 2018 年 58卷 15期

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吴绍凤;郑荣荣;司凤磊;刘宏博;郭文聪;李宁;侯琳
来源:
山东医药 2018 年 58卷 15期
标签:
表没食子儿茶素没食子酸酯 乙肝病毒 自噬 细胞自噬
目的 观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对乙肝病毒复制的体外抑制作用,并探讨其机制.方法 取对数生长期HepG2.2.15细胞,分为A、B、C组.A组、B组分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG,对照组不作任何处理.培养24h收集细胞上清,检测各组乙肝病毒e抗原和s抗原,采用real-time PCR法检测各组乙肝病毒DNA.取对数生长期HepG2.2.15细胞,接种于6 cm培养皿,将细胞分为1、2、3、4组.1、2组分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG,3组加入200 nmol/L的Rapamycin,4组不做任何处理,培养24h.采用Westernblotting法检测各组细胞自噬标记蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ、自噬降解相关蛋白p62/β-actin.取对数生长期HepG2.2.15细胞接种于12孔板,将细胞分为空白组、对照组、自噬抑制组(又分为3-MA组和CQ组).其中,对照组、3-MA组、CQ组又各自分为2组.对照组分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG处理.3-MA组和CQ组分别先用终浓度为10 mmol/L的3-MA和50 μmol/L的CQ预处理半小时,再分别加入终浓度为40和80 μmol/L的EGCG.空白组不作任何处理.24h后收集各组细胞上清,检测各组乙肝病毒e抗原、s抗原和乙肝病毒DNA.结果 与C组比较,培养24h时A、B组乙肝病毒e抗原、s抗原相对量及均乙肝病毒DNA的相对表达量降低(P均<0.01).与4组比较,1、2、3组LC3