目的 观察雷帕霉素对人甲状腺乳头状癌细胞株K1增殖、迁移能力的影响,并探讨其可能机制.方法 配制雷帕霉素和3-甲基腺嘌呤(3-MA)溶液,选择雷帕霉素作用浓度(对K1细胞的半抑制浓度)10μmol/L、3-MA作用浓度1 mmol/L进行后续实验.将K1细胞分为对照组、雷帕霉素组、雷帕霉素+3-MA组.对照组不做任何处理,加入2 mL培养基;雷帕霉素组加入100μmol/L雷帕霉素0.2 ml及培养基1.8 mL;雷帕霉素+3-MA组先加入100μmol/L雷帕霉素0.2 ml及培养基1.79 mL,1 h后加入1 mmol/L 3-MA溶液10 uL.培养24 h后,采用MTT法检测各组细胞的增殖能力,Transwell法检测各组细胞的迁移能力,Western blotting法检测各组细胞中的自噬相关蛋白LC3、p62.结果 培养48、72、96 h后,雷帕霉素组细胞增殖能力低于对照组,雷帕霉素+3-MA组细胞增殖能力高于雷帕霉素组(P均<0.01).雷帕霉素组穿膜细胞数少于对照组,雷帕霉素+3-MA组穿膜细胞数多于雷帕霉素组(P均<0.01).雷帕霉素组LC3蛋白相对表达量高于对照组,p62蛋白相对表达量低于对照组(P均<0.01);雷帕霉素+3MA组LC3蛋白相对表达量低于雷帕霉素组,p62蛋白相对表达量高于雷帕霉素组(P均<0.01).结论 雷帕霉素可抑制甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移能力,其机制可能与诱发自噬有关.
作者:赵永魁;王晓涛;陈建立;王长友;张国志
来源:山东医药 2018 年 58卷 23期