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目的 观察脱氢表雄酮(DHEA)对高脂诱导的人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响,以及细胞色素P450芳香酶(CYP19)在此过程中的作用.方法 取健康新生儿脐带,分离并培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).将HUVEC分为4组:正常对照组予以DMEM/F12培养基,ox-LDL组予以DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,DHEA组予以DMEM/F12培养基+1μmol/L DHEA,ox-LDL+DHEA组予以DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.作用24 h后,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测各组细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达.将HUVEC分为pcDNA3.1-CYP19-GFP转染组、pcDNA3.1-GFP空质粒组,通过脂质体介导的方法分别转染pcDNA3.1-CYP19-GFP真核表达质粒和pcDNA3.1-GFP空质粒.将pcDNA3.1-CYP19-GFP转染组再分为3组:CYP19组予以无血清DMEM/F12培养基,CYP19+ox-LDL组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,CYP19+ox-LDL+DHEA组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.将pcDNA3.1-GFP空质粒组再分为3组:空质粒组予以无血清DMEM/F12培养基;空质粒+ox-LDL组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,空质粒+ox-LDL+DHEA组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.均培养24h后,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测各组细

作者:周颖;李桃;肖芳;黄江梅;赵敏

来源:山东医药 2018 年 58卷 26期

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作者:
周颖;李桃;肖芳;黄江梅;赵敏
来源:
山东医药 2018 年 58卷 26期
标签:
动脉粥样硬化 脱氢表雄酮 细胞色素P450芳香酶 基质金属蛋白酶-2 人脐静脉内皮细胞
目的 观察脱氢表雄酮(DHEA)对高脂诱导的人脐静脉内皮细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达的影响,以及细胞色素P450芳香酶(CYP19)在此过程中的作用.方法 取健康新生儿脐带,分离并培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC).将HUVEC分为4组:正常对照组予以DMEM/F12培养基,ox-LDL组予以DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,DHEA组予以DMEM/F12培养基+1μmol/L DHEA,ox-LDL+DHEA组予以DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.作用24 h后,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测各组细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达.将HUVEC分为pcDNA3.1-CYP19-GFP转染组、pcDNA3.1-GFP空质粒组,通过脂质体介导的方法分别转染pcDNA3.1-CYP19-GFP真核表达质粒和pcDNA3.1-GFP空质粒.将pcDNA3.1-CYP19-GFP转染组再分为3组:CYP19组予以无血清DMEM/F12培养基,CYP19+ox-LDL组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,CYP19+ox-LDL+DHEA组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.将pcDNA3.1-GFP空质粒组再分为3组:空质粒组予以无血清DMEM/F12培养基;空质粒+ox-LDL组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL,空质粒+ox-LDL+DHEA组予以无血清DMEM/F12培养基+30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA.均培养24h后,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测各组细