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目的 观察原因不明复发性自然流产 (URSA) 患者外周血白细胞介素6 (IL-6) 、微小核糖核酸 (miRNA) let-7d-5p水平变化, 探讨二者在URSA发病中的关系.方法 选取正常早孕妇女 (正常妊娠组) 和URSA患者 (URSA组) 各30例, 空腹抽取其外周静脉血, ELISA法检测血清IL-6蛋白, q PCR法检测单个核细胞 (PBMC) 中的let-7d-5p.采用Target Scan生物信息软件, 以Target Scan 7. 1程序预测let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'非翻译区 (3'UTR) 是否存在潜在结合位点;将293T细胞分为干预组和对照组, 分别同时转染let-7d-5p (空白对照NC) 与野生型或突变型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因pmir GLO载体, 采用双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶报告基因活性.将293T细胞分为3组, 过表达组、抑表达组利用Lipofectamine 2000转染let-7d-5p mimics及inhibitor, 空白对照组转染阴性对照引物;转染24 h后收集细胞, q PCR检测各组细胞中的IL-6 mRNA, ELISA检测各组培养上清液中的IL-6.结果 与正常妊娠组比较, URSA组外周血IL-6蛋白水平升高, 而PBMC中let-7d-5p表达降低 (P均<0. 05) .Target Scan 7. 1程序预测显示, let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报告基因系统检测显示, 与对照组比较, 干预组能降

作者:谷兆琪;尹训强;王东梅;张云虹;魏然;张振;朱肖肖;郭强;周宪宾;褚楚;赵霖;李霞

来源:山东医药 2019 年 59卷 2期

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作者:
谷兆琪;尹训强;王东梅;张云虹;魏然;张振;朱肖肖;郭强;周宪宾;褚楚;赵霖;李霞
来源:
山东医药 2019 年 59卷 2期
标签:
原因不明复发性自然流产 微小核糖核酸 白细胞介素6 母胎免疫耐受 生殖免疫 unexplained recurrent spontaneous abortion microRNA interleukin-6 materno-fetal immunotolerance reproductive immunology
目的 观察原因不明复发性自然流产 (URSA) 患者外周血白细胞介素6 (IL-6) 、微小核糖核酸 (miRNA) let-7d-5p水平变化, 探讨二者在URSA发病中的关系.方法 选取正常早孕妇女 (正常妊娠组) 和URSA患者 (URSA组) 各30例, 空腹抽取其外周静脉血, ELISA法检测血清IL-6蛋白, q PCR法检测单个核细胞 (PBMC) 中的let-7d-5p.采用Target Scan生物信息软件, 以Target Scan 7. 1程序预测let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'非翻译区 (3'UTR) 是否存在潜在结合位点;将293T细胞分为干预组和对照组, 分别同时转染let-7d-5p (空白对照NC) 与野生型或突变型IL-6 mRNA 3'UTR荧光素酶报告基因pmir GLO载体, 采用双荧光素酶报告基因系统检测荧光素酶报告基因活性.将293T细胞分为3组, 过表达组、抑表达组利用Lipofectamine 2000转染let-7d-5p mimics及inhibitor, 空白对照组转染阴性对照引物;转染24 h后收集细胞, q PCR检测各组细胞中的IL-6 mRNA, ELISA检测各组培养上清液中的IL-6.结果 与正常妊娠组比较, URSA组外周血IL-6蛋白水平升高, 而PBMC中let-7d-5p表达降低 (P均<0. 05) .Target Scan 7. 1程序预测显示, let-7d-5p与IL-6 mRNA的3'UTR之间具有潜在的碱基互补结合位点;双荧光素酶报告基因系统检测显示, 与对照组比较, 干预组能降