目的 观察小干扰RNA(siRNA)技术沉默大肠癌细胞中Cripto-1表达联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对大肠癌细胞增殖和迁移的影响,并探讨其与上皮间质转化(EMT)的关系.方法 体外培养人大肠癌Lovo细胞,将细胞分为正常对照组、Cripto-1 siRNA组、5-FU组、联合组.正常对照组加入含10％胎牛血清的RPMI1640培养液中常规培养48 h;Cripto-1 siRNA组加入100μL无血清Opti-MEM培养基、8μL LipofectamineTM2000、10μL siRNA混匀,进行转染,转染完成后更换普通培养基继续培养48 h;5-FU组加入10 mg/L 5-FU培养48 h;联合组先按Cripto-1 siR-NA组的方法进行转染,然后加入10 mg/L 5-FU继续培养48 h.采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况,Transwell实验观察细胞的迁移能力,Western blotting法检测细胞中Cripto-1蛋白及上皮标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、间质标志物Snail蛋白的相对表达量.结果 Cripto-1 siRNA、5-FU组、联合组的细胞增殖率均低于正常对照组(P均<0.05),联合组细胞细胞增殖率低于Cripto-1 siRNA和5-FU组(P均<0.05),Cripto-1 siRNA组与5-FU组比较差异无统计学意义(P>0.05).Cripto-1 siRNA、5-FU组、联合组的细胞迁移数较正常对照组减少(P均<0.05),联合组细胞迁移数较Cripto-1 siRNA组和5-FU组减少(P均<0.05),5-FU组较Cripto-1

作者：华丽；周燕红；游红霞

来源：山东医药 2019 年 59卷 17期