目的 观察胃癌细胞中乳酸脱氢酶A(LDH-A)的表达变化,并探讨沉默LDH-A表达对胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响.方法 体外培养胃癌细胞株OCUM-1和正常胃黏膜上皮细胞株RGM-1,采用qRT-PCR法检测细胞中LDH-A mRNA相对表达量,Western blotting法检测细胞中LDH-A蛋白表达情况.将OCUM-1细胞随机分为3组,LDH-A siRNA组采用Lipfoctamine2000脂质体转染试剂对细胞转染LDH-A siRNA序列,转染对照组转染siRNA无义对照序列,空白对照组只加入培养基.转染48 h后收集各组细胞,显微镜下观察胃癌细胞的形态学变化,采用Western blotting法检测细胞中上皮细胞特征蛋白上皮性钙黏蛋白(E-cadherin)、细胞角蛋白(Cytokeratin)和间质细胞特征蛋白神经性钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子(Snail)、β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vim-entin)的表达.结果 OCUM-1细胞中LDH-A mRNA及蛋白表达高于RGM-1细胞(P均<0.05).LDH-A siRNA组LDH-A mRNA及蛋白表达低于转染对照组和空白对照组(P均<0.05).显微镜下可见LDH-A siRNA组细胞排列紧密,细胞黏附性增加,表现为上皮细胞特性.LDH-A siRNA组E-cadherin、Cytokeratin蛋白表达水平高于转染对照组和空白对照组,N-cadherin、Snail、β-catenin、Vimentin蛋白表达水平低于转染对照组和空白对

作者：陈妍；陈加华；李小琴

来源：山东医药 2019 年 59卷 17期