目的 观察吗啡对人肝癌细胞Huh7诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)血管生成能力的影响,并探讨其可能的分子机制.方法 取对数生长期Huh7细胞,加入不同浓度吗啡(0、0.01、0.1、1、10、100、1000μmol/L)作用不同时间(0、6、12、24 h),根据细胞增殖率及细胞毒性检测结果选择1μmol/L吗啡作用24 h为最佳条件.将Huh7细胞分为观察组和对照组,观察组加入1μmol/L吗啡作用24 h,对照组不予特殊处理.收集两组上清液,与ECM基础培养液混合后孵育HUVECs,采用管腔形成实验观察其血管生成能力(以管腔形成数量表示);采用Western blotting法检测细胞缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达,ELISA法检测上清液中血管内皮生长因子(VEGF)表达.将Huh7细胞分为si-HIF-1α组、si-NC组和空白对照组,si-HIF-1α组、si-NC组分别采用脂质体LipofectaminTM2000法转染siHIF-1α及其阴性对照,空白对照组不予特殊处理,各组均加入1μmol/L吗啡作用24 h,比较各组血管生成能力及HIF-1α、VEGF表达.结果 与对照组比较,观察组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达均升高(P均<0.05).与si-NC组、空白对照组比较,si-HIF-1α组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达均降低(P均<0.05).si-NC组与空白对照组管腔形成数量及HIF-1α、VEGF表达比较均无统计学差异(P均>0.05

作者：张志发；朱梦娇；周志强；杨少兵

来源：山东医药 2020 年 60卷 35期