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目的 观察过表达miR-21对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓干细胞(hDPSCs)炎症、凋亡和自噬的影响.方法 取生长良好的第3~4代hDPSCs,随机分为对照组、LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组,LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组分别使用Lipofectamine 2000转染试剂转染miR-NC mimics、miR-21 mimics,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组均加入5μg/mL LPS,继续培养48 h.采用ELISA法检测各组细胞上清液白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)和自噬相关蛋白死骨片1(p62)、自噬微管相关蛋白轻链3抗体(LC3B)表达.结果 与对照组比较,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR21 mimics组细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α水平均升高,且LPS组、LPS+miR-NC mimics组升高更明显(P均<0.05).与对照组比较,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组细胞凋亡率及细胞Cleaved Caspase-3、LC3BⅡ表达均升高,p62、LC3BⅠ表达均降低,且LPS组、LPS+miR-NC mimics组变化更明显(P均<0.05).结论 LPS可诱导hDPSCs发生炎症反应,并促进其凋亡和自噬,而过表达mi

作者:林玉祥;林慧;车立纯;田河

来源:山东医药 2021 年 61卷 23期

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作者:
林玉祥;林慧;车立纯;田河
来源:
山东医药 2021 年 61卷 23期
标签:
牙髓干细胞 miR-21 脂多糖 细胞凋亡 细胞自噬 Cleaved Caspase-3 IL-1β IL-6 TNF-α LC3B
目的 观察过表达miR-21对脂多糖(LPS)诱导的人牙髓干细胞(hDPSCs)炎症、凋亡和自噬的影响.方法 取生长良好的第3~4代hDPSCs,随机分为对照组、LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组,LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组分别使用Lipofectamine 2000转染试剂转染miR-NC mimics、miR-21 mimics,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组均加入5μg/mL LPS,继续培养48 h.采用ELISA法检测各组细胞上清液白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting法检测凋亡相关蛋白裂解的半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)和自噬相关蛋白死骨片1(p62)、自噬微管相关蛋白轻链3抗体(LC3B)表达.结果 与对照组比较,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR21 mimics组细胞上清液IL-1β、IL-6、TNF-α水平均升高,且LPS组、LPS+miR-NC mimics组升高更明显(P均<0.05).与对照组比较,LPS组、LPS+miR-NC mimics组、LPS+miR-21 mimics组细胞凋亡率及细胞Cleaved Caspase-3、LC3BⅡ表达均升高,p62、LC3BⅠ表达均降低,且LPS组、LPS+miR-NC mimics组变化更明显(P均<0.05).结论 LPS可诱导hDPSCs发生炎症反应,并促进其凋亡和自噬,而过表达mi