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目的 探讨盐霉素对乳腺癌干细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养MCF-7细胞形成微球体,取第3代微球体细胞,分别加入CD44-FITC、CD24-PE,采用流式细胞术检测乳腺癌干细胞百分比.取第3代微球体细胞,分别给予0、0.5、2、5、7、9μmol/L盐霉素干预12、24、48 h,采用MTT法检测乳腺癌干细胞盐霉素干预后细胞活性;取第3代微球体细胞,分别给予0、2.5、5、9μmol/L盐霉素干预24 h,倒置相差显微镜下观察乳腺癌干细胞形态学变化;取第3代微球体细胞,分别给予0、2、5、9μmol/L盐霉素干预24 h,分别采用FITC-Annexin V/PI双染法、PI单染法检测乳腺癌干细胞凋亡率和细胞周期;取第3代微球体细胞,分别给予0、0.5、2、5、9μmol/L盐霉素干预24 h,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、PARP、β-catenin、Survivin、Bcl-2、Bax表达.结果 经流式细胞仪鉴定,在悬浮微球细胞中CD44+/CD24-/low表型的乳腺癌干细胞比例为(87.0±0.4)%,在MCF-7细胞中为(40.1±1.0)%,二者比较P<0.05.不同浓度盐霉素均能抑制乳腺癌干细胞存活,并且其抑制作用呈时间和浓度依赖性(P均<0.05).倒置相差显微镜下观察,盐霉素干预后乳腺癌微球体逐渐解聚,密度降低,细胞大小不一、极度不规则,肿瘤细胞内部出现颗粒,细胞

作者:曹露;吴开祥;张亚;孙雯雯;杨会;张树鹏

来源:山东医药 2021 年 61卷 25期

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作者:
曹露;吴开祥;张亚;孙雯雯;杨会;张树鹏
来源:
山东医药 2021 年 61卷 25期
标签:
乳腺癌 盐霉素 肿瘤干细胞 细胞增殖 细胞凋亡
目的 探讨盐霉素对乳腺癌干细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制.方法 体外培养MCF-7细胞形成微球体,取第3代微球体细胞,分别加入CD44-FITC、CD24-PE,采用流式细胞术检测乳腺癌干细胞百分比.取第3代微球体细胞,分别给予0、0.5、2、5、7、9μmol/L盐霉素干预12、24、48 h,采用MTT法检测乳腺癌干细胞盐霉素干预后细胞活性;取第3代微球体细胞,分别给予0、2.5、5、9μmol/L盐霉素干预24 h,倒置相差显微镜下观察乳腺癌干细胞形态学变化;取第3代微球体细胞,分别给予0、2、5、9μmol/L盐霉素干预24 h,分别采用FITC-Annexin V/PI双染法、PI单染法检测乳腺癌干细胞凋亡率和细胞周期;取第3代微球体细胞,分别给予0、0.5、2、5、9μmol/L盐霉素干预24 h,采用Western blotting法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9、PARP、β-catenin、Survivin、Bcl-2、Bax表达.结果 经流式细胞仪鉴定,在悬浮微球细胞中CD44+/CD24-/low表型的乳腺癌干细胞比例为(87.0±0.4)%,在MCF-7细胞中为(40.1±1.0)%,二者比较P<0.05.不同浓度盐霉素均能抑制乳腺癌干细胞存活,并且其抑制作用呈时间和浓度依赖性(P均<0.05).倒置相差显微镜下观察,盐霉素干预后乳腺癌微球体逐渐解聚,密度降低,细胞大小不一、极度不规则,肿瘤细胞内部出现颗粒,细胞