目的 探讨敲低蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)对卵巢癌细胞多西紫杉醇(DTX)化疗敏感性的影响及其机制.方法 体外培养人正常卵巢上皮细胞株IOSE80(以下称IOSE80细胞)及人卵巢癌细胞株SKOV3、ES-2、A2780(以下分别称SKOV3、ES-2、A2780细胞),采用RT-qPCR法和Western blotting法检测各细胞PRMT5 mRNA和蛋白表达,选择PRMT5 mRNA和蛋白相对表达量最高的卵巢癌细胞进行后续实验.取传4代、对数生长期、生长状态良好的卵巢癌细胞,随机分为空白对照组、阴性对照组、siRNA-1组、siRNA-2组,空白对照组不予转染,阴性对照组转染阴性对照质粒,siRNA-1组转染PRMT5 siRNA-1质粒,siRNA-2组转染PRMT5 siRNA-2质粒,采用RT-qPCR法和Western blotting法检测各组PRMT5 mRNA和蛋白表达.取各组上述转染后细胞,分别给予1、5、10、15、20、25μmol/L DTX干预48 h,采用MTT法检测各组细胞增殖抑制率.选择siRNA-1组和siRNA-2组中细胞增殖抑制率接近50%的DTX浓度进行后续实验.取各组上述转染后细胞,给予相应浓度DTX干预48 h,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率,采用Ki67/Hoechst双染法检测细胞增殖情况,采用Western blotting法检测JAK1、JAK3、STAT6及p-JAK1、p-JAK3、p-STAT6蛋白表达.结果 SKOV3、ES-2、A2780细胞PRMT5 mRNA和
作者:金男;杨洪艳;裴会;姜姗姗;李烁
来源:山东医药 2022 年 62卷 16期