目的 观察丁苯酞在成人脂肪基质细胞(ADSC)分化为神经元样细胞过程中的分化促进及自噬激动作用.方法 取成人ADSC,应用1 mmol/L的β-巯基乙醇进行预诱导24 h后,分为β-巯基乙醇组、β-巯基乙醇+丁苯酞组、β-巯基乙醇+雷帕霉素组.其中β-巯基乙醇组加入含5 mmol/L的β-巯基乙醇,β-巯基乙醇+丁苯酞组加入5 mmol/L的β-巯基乙醇和10μmol/L的丁苯酞,β-巯基乙醇+雷帕霉素组加入5 mmol/L的β-巯基乙醇和200μg/L的雷帕霉素.在预诱导、诱导1h、诱导3h、诱导5h、诱导8h时,采用倒置相差显微镜观察各组细胞形态学变化,计算细胞分化率.在诱导1h、诱导5h时,在透射电镜下观察细胞的超微结构,计数自噬小体和自噬溶酶体数量.在诱导1h、诱导3h、诱导5h、诱导8h时,采用MTT法检测细胞存活率.在诱导5h时,采用免疫细胞化学法检测各组细胞中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋-200(NF-200).在诱导1 h、诱导3 h、诱导5 h、诱导8 h时,采用免疫细胞化学法检测各组细胞中LC3蛋白.结果 诱导后的三组细胞形态学变化相似,分化的细胞呈典型的神经元样细胞形态;细胞核体积大而圆,染色浅,其中常染色质多、异染色质较少,部分神经元样细胞的细胞浆可见大量内质网扩张,线粒体出现肿胀、嵴断裂,细胞内出现具有双层膜结构的自噬小体.随着
作者：陆艳卉；徐康；赵紫烨；李斌；郭佳；周桂娟
来源：山东医药 2022 年 62卷 21期
