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目的 探讨核仁素对伯基特淋巴瘤细胞长春新碱敏感性的影响及其机制.方法 体外传代培养伯基特淋巴瘤CA46细胞.取传3代、对数生长期、生长状态良好的CA46细胞,随机分为Control组、核仁素-NC组、核仁素-KD组和核仁素-OE组,核仁素-NC组、核仁素-KD组、核仁素-OE组分别转染对照质粒、核仁素shRNA质粒、核仁素mRNA质粒,Control组不予转染.采用RT-qPCR法检测各组CA46细胞核仁素、Bcl-2 mRNA表达;采用MTT法检测细胞存活率,并计算长春新碱的半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用蛋白免疫印迹实验检测Bcl-2蛋白表达;采用免疫共沉淀实验观察核仁素免疫沉淀复合物中Bcl-2 mRNA富集强度.结果 Control组和核仁素-NC组CA46细胞核仁素mRNA相对表达量、长春新碱的IC50、长春新碱诱导后凋亡率以及Bcl-2 mRNA与蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05).核仁素-KD组CA46细胞核仁素mRNA相对表达量、长春新碱的IC50、长春新碱诱导后凋亡率以及Bcl-2 mRNA与蛋白相对表达量均低于Control组和核仁素-NC组(P均<0.05),而核仁素-OE组上述指标均高于Control组和核仁素-NC组(P均<0.05).在核仁素免疫沉淀复合物中可见Bcl-2 mRNA显著富集.结论 核仁素可能通过上调Bcl-2表达,并直接与Bcl-2 mRNA结合而促进其稳定

作者:徐伟格;郝秀君;李英新;贾鑫新;杨艳敏;原现华

来源:山东医药 2023 年 63卷 25期

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作者:
徐伟格;郝秀君;李英新;贾鑫新;杨艳敏;原现华
来源:
山东医药 2023 年 63卷 25期
标签:
伯基特淋巴瘤 核仁素 长春新碱 敏感性 Burkitt lymphoma nucleolin vincristine sensitivity
目的 探讨核仁素对伯基特淋巴瘤细胞长春新碱敏感性的影响及其机制.方法 体外传代培养伯基特淋巴瘤CA46细胞.取传3代、对数生长期、生长状态良好的CA46细胞,随机分为Control组、核仁素-NC组、核仁素-KD组和核仁素-OE组,核仁素-NC组、核仁素-KD组、核仁素-OE组分别转染对照质粒、核仁素shRNA质粒、核仁素mRNA质粒,Control组不予转染.采用RT-qPCR法检测各组CA46细胞核仁素、Bcl-2 mRNA表达;采用MTT法检测细胞存活率,并计算长春新碱的半数抑制浓度(IC50);采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用蛋白免疫印迹实验检测Bcl-2蛋白表达;采用免疫共沉淀实验观察核仁素免疫沉淀复合物中Bcl-2 mRNA富集强度.结果 Control组和核仁素-NC组CA46细胞核仁素mRNA相对表达量、长春新碱的IC50、长春新碱诱导后凋亡率以及Bcl-2 mRNA与蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05).核仁素-KD组CA46细胞核仁素mRNA相对表达量、长春新碱的IC50、长春新碱诱导后凋亡率以及Bcl-2 mRNA与蛋白相对表达量均低于Control组和核仁素-NC组(P均<0.05),而核仁素-OE组上述指标均高于Control组和核仁素-NC组(P均<0.05).在核仁素免疫沉淀复合物中可见Bcl-2 mRNA显著富集.结论 核仁素可能通过上调Bcl-2表达,并直接与Bcl-2 mRNA结合而促进其稳定