目的 构建能选择性杀伤表达癌胚抗原(CEA)的结直肠癌细胞的条件复制型腺病毒载体.方法 PCR扩增CEA基因5'端调控序列,构建以EGFPLuc作为报告基因的表达质粒pCEA-EGFPLuc.利用脂质体将pCEA-EGFPLuc导入CEA阳性和阴性细胞中,通过检测增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达和荧光素酶(luciferase)活性,评价CEA启动子活性.构建由CEA启动子调控的E1A,并携带HSVtk基因的条件复制型腺病毒Ad.CEA-E1A/CMV-TK,分别感染CEA阳性肿瘤细胞(Lovo和SW620)和阴性肿瘤细胞(HeLa),通过E1A表达和细胞存活率检测,评价该病毒对CEA阳性肿瘤细胞的选择性杀伤效果及联合应用环氧鸟苷(GCV)后的协同效应.结果 CEA启动子具有较好的选择性和较高的活性.Ad.CEA-E1A/CMV-TK只在CEA阳性的肿瘤细胞中表达E1A.感染Ad.CEA-ElA/CMV-TK后,Lovo和SW620细胞的存活率分别为(36.72±2.49)
作者:王梦筠;韦芳;王慧萍;季迅达;陈霞芳;李惠明;冯烨;王煜非;黄倩
来源:上海交通大学学报(医学版) 2009 年 29卷 7期