目的 探讨气道上皮细胞三磷酸腺苷(ATP)的释放及胞内钙离子(Ca2+)在周期性压力波所致气道黏液分泌中的作用.方法 体外培养人支气管上皮细胞株16HBE,通过节律性倾斜细胞培养板,利用液体的表面张力、大气压及液体重力所产生的牵张力(剪应力)及压力(压应力)给予细胞机械刺激.根据对培养细胞所施加条件不同分为对照组、单纯倾斜组、倾斜+Ca2+螯合剂BAPTA-AM组、倾斜+Ca2+螯合剂EGTA组和倾斜+P2Y受体阻断剂RB-2组.分别采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定各组细胞存活率,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组黏蛋白(MUC)5AC mRNA表达水平,ELISA法检测细胞培养上清液中MUC5AC蛋白含量,高效液相色谱法(HPLC)检测培养液中ATP释放量,倒置荧光显微镜观察细胞内Ca2浓度变化.结果 与对照组相比,单纯倾斜组16HBE细胞MUC5AC mRNA和蛋白的表达量及细胞培养上清液中ATP的含量均明显升高(P＜0.05)；倾斜+BAPTA-AM组、倾斜+RB-2组ATP及MUC5AC蛋白表达量均明显低于单纯倾斜组(P＜0.05)；倾斜+EGTA组和倾斜+ RB-2组MUC5AC mRNA表达量与单纯倾斜组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 节律性压力可刺激气道黏膜上皮MUC5AC分泌,其机制与依赖Ca2+的ATP释放密切相关；该机制中的Ca2+几乎全部由胞内存储钙提供.
作者：苏晖晖；周向东
来源：上海交通大学学报（医学版） 2011 年 31卷 12期
