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目的 研究阿尔茨海默病(AD)小鼠大脑和脊髓自噬变化情况.方法 分离3月、8月和11月龄AD小鼠和同龄正常对照小鼠(n=6)的大脑和脊髓,左侧半脑和脊髓腰段用于组织切片的制备,右侧半脑及剩余脊髓用于提取蛋白.采用免疫组织化学方法观察脑内和脊髓淀粉样斑块;激光共聚焦显微镜观察自噬指标LC3在脑内和脊髓运动神经元中的分布情况;Westernblotting检测8月龄小鼠大脑及脊髓LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达水平;Nissl染色计数脊髓运动神经元.结果 免疫组织化学检测结果显示:3月龄AD小鼠脑内无明显淀粉样斑块沉积,8月龄时皮层和海马出现大量斑块,11月龄时斑块数量明显增多;AD小鼠脊髓腰段运动神经元内存在淀粉样蛋白,但未检测到细胞外斑块沉积.激光共聚焦显微镜观察结果显示;8月龄AD小鼠大脑皮层LC3阳性自噬小泡数量多于对照小鼠;3月龄AD小鼠脊髓运动神经元内存在LC3阳性自噬小泡,自噬小泡数量在8月龄和11月龄时明显增多.Western blotting结果显示:与8月龄对照小鼠比较,8月龄AD小鼠脑组织LC3-Ⅱ蛋白表达升高(P<0.01),脑组织Beclin 1 蛋白表达降低(P<0.05),脊髓LC3-Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05),脊髓Beclin 1蛋白表达水平无明显变化(P>0.05).Nissl染色结果显示:与8月龄对照小鼠比较,8月龄AD小鼠脊髓腰段运动神经元数

作者:李丽喜;章素芳;张鑫;乐卫东

来源:上海交通大学学报(医学版) 2012 年 32卷 5期

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李丽喜;章素芳;张鑫;乐卫东
来源:
上海交通大学学报(医学版) 2012 年 32卷 5期
标签:
阿尔茨海默病 脊髓 淀粉样斑块 自噬
目的 研究阿尔茨海默病(AD)小鼠大脑和脊髓自噬变化情况.方法 分离3月、8月和11月龄AD小鼠和同龄正常对照小鼠(n=6)的大脑和脊髓,左侧半脑和脊髓腰段用于组织切片的制备,右侧半脑及剩余脊髓用于提取蛋白.采用免疫组织化学方法观察脑内和脊髓淀粉样斑块;激光共聚焦显微镜观察自噬指标LC3在脑内和脊髓运动神经元中的分布情况;Westernblotting检测8月龄小鼠大脑及脊髓LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达水平;Nissl染色计数脊髓运动神经元.结果 免疫组织化学检测结果显示:3月龄AD小鼠脑内无明显淀粉样斑块沉积,8月龄时皮层和海马出现大量斑块,11月龄时斑块数量明显增多;AD小鼠脊髓腰段运动神经元内存在淀粉样蛋白,但未检测到细胞外斑块沉积.激光共聚焦显微镜观察结果显示;8月龄AD小鼠大脑皮层LC3阳性自噬小泡数量多于对照小鼠;3月龄AD小鼠脊髓运动神经元内存在LC3阳性自噬小泡,自噬小泡数量在8月龄和11月龄时明显增多.Western blotting结果显示:与8月龄对照小鼠比较,8月龄AD小鼠脑组织LC3-Ⅱ蛋白表达升高(P<0.01),脑组织Beclin 1 蛋白表达降低(P<0.05),脊髓LC3-Ⅱ蛋白表达升高(P<0.05),脊髓Beclin 1蛋白表达水平无明显变化(P>0.05).Nissl染色结果显示:与8月龄对照小鼠比较,8月龄AD小鼠脊髓腰段运动神经元数