目的 研究液氮蒸汽熏蒸法(简称气相冷冻法)和直接投入液氮冷冻法(简称液相冷冻法)对人类精子冷冻复苏后运动能力、形态学及超微结构的影响.方法 选择25例捐精者的精液标本,按照1∶1的比例添加改良甘油-卵黄-枸橼酸钠(GYC)作为冷冻保护剂.每份精液标本等分为2份,分别进行气相法冷冻和液相法冷冻.复苏后,利用IVOS精子分析仪测定精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数,巴氏染色观察精子形态并计算形态正常率,透射电子显微镜观察精子超微结构.结果 气相法冷冻从28℃降温到- 185℃用时468 s,再经过1h后降温到- 196℃；液相法冷冻从30℃降温到- 196℃用时90 s.两种方法冷冻复苏后精子总活动率、前向运动精子百分率、运动参数、形态正常率与冷冻前比较均明显降低(P＜0.05).气相法冷冻复苏后精子的复苏率、总活动率、前向运动精子百分率均高于液相法,差异有统计学意义(P＜0.05)；两种冷冻方法复苏后精子形态正常率、运动参数比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).通过透射电子显微镜观察,使用 GYC作为冷冻保护剂,两种方法冷冻复苏后,精子头部质膜和顶体膜超微结构未出现明显的损伤.结论 改良GYC保护剂对精子超微结构具有保护作用；气相冷冻法冷冻人类精子的复苏结果优于液相法.
作者：刘锋；孟颖；王峰；刘勇；王如瑶；卢慧；施文博；李铮
来源：上海交通大学学报（医学版） 2012 年 32卷 8期
