目的 探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响及可能机制.方法 采用实时定量PCR技术检测60例胃癌患者癌组织及癌旁组织中DNM T1的mRNA水平.利用慢病毒包装建立稳定表达DNMT1-shRNA的MKN45、SGC7901 、MKN28细胞系,同时设未处理的未转染组、加入慢病毒阴性对照的阴性对照组.CCK8法检测各组细胞的增殖情况,Western blotting检测CDC25B的表达水平,Transwell实验检测DNMT1对胃癌细胞迁移能力的影响.结果 52例(86.7%,52/60)患者的胃癌组织中DNMT1的mRNA水平较癌旁组织上调,其中17例(28.3%,17/60)上调2倍以上;有淋巴结转移、有癌旁血管浸润及TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者其转录水平明显上调(P<0 05).转染DNMT1-shRNA后3d,MKN45、SGC7901以及MKN28细胞生长明显受抑,转染组的3株细胞吸光度值均明显低于未转染组及阴性对照组(P=0.000).转染组CDC25B蛋白表达降低,迁移力下降(均P<0.05).结论 DNMT1在胃癌组织中的表达明显高于癌旁组织,其具有促进胃癌细胞增殖和远处转移的作用,DNMT1可能通过调控CDC25B来发挥致癌作用.
作者:周燚;秦俭;李旭;朱麟;李继坤
来源:上海交通大学学报(医学版) 2016 年 36卷 7期