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目的·探讨CD147基因沉默对三阴性乳腺癌细胞的增殖抑制作用及机制.方法·体外培养人正常乳腺上皮细胞HMEC及3株三阴性乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、HCC70和T4-2),采用real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内CD147 mRNA和蛋白表达.设计针对人CD147基因编码区的siRNA序列,构建重组慢病毒Lv-shRNA-CD147并感染乳腺癌细胞,设立阴性对照(Lv-NC感染组)和不感染细胞对照(细胞对照组).采用real-time PCR和Western blotting检测CD147基因沉默效果;采用MTT法和Transwell试验分别检测细胞增殖活性和细胞迁移能力.收集病毒感染后72 h的HCC70细胞,采用Western blotting检测细胞内增殖、迁移、凋亡相关蛋白(β-catenin、MMP2、MMP9和Bax)的表达.结果·3株乳腺癌细胞中CD147 mRNA及蛋白的表达均显著高于HMEC细胞(P<0.01).与Lv-NC感染组和细胞对照组比较,Lv-shRNA-CD147感染组CD147 mRNA和蛋白表达下调,细胞增殖活性降低,细胞迁移能力减弱,差异均有统计学意义(P<0.01).病毒感染后72 h,与相应的Lv-NC感染组和细胞对照组比较,Lv-shRNA-CD147感染组HCC70细胞内β-catenin、MMP2、MMP9表达降低,而Bax表达增高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论·CD147基因沉默可以抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖和迁移.

作者:汪成;庄志刚;单鸣;徐明

来源:上海交通大学学报(医学版) 2017 年 37卷 3期

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作者:
汪成;庄志刚;单鸣;徐明
来源:
上海交通大学学报(医学版) 2017 年 37卷 3期
标签:
三阴性乳腺癌 CD147 基因沉默 增殖 迁移 triple negative breast cancer CD147 gene silence proliferation migration
目的·探讨CD147基因沉默对三阴性乳腺癌细胞的增殖抑制作用及机制.方法·体外培养人正常乳腺上皮细胞HMEC及3株三阴性乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、HCC70和T4-2),采用real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内CD147 mRNA和蛋白表达.设计针对人CD147基因编码区的siRNA序列,构建重组慢病毒Lv-shRNA-CD147并感染乳腺癌细胞,设立阴性对照(Lv-NC感染组)和不感染细胞对照(细胞对照组).采用real-time PCR和Western blotting检测CD147基因沉默效果;采用MTT法和Transwell试验分别检测细胞增殖活性和细胞迁移能力.收集病毒感染后72 h的HCC70细胞,采用Western blotting检测细胞内增殖、迁移、凋亡相关蛋白(β-catenin、MMP2、MMP9和Bax)的表达.结果·3株乳腺癌细胞中CD147 mRNA及蛋白的表达均显著高于HMEC细胞(P<0.01).与Lv-NC感染组和细胞对照组比较,Lv-shRNA-CD147感染组CD147 mRNA和蛋白表达下调,细胞增殖活性降低,细胞迁移能力减弱,差异均有统计学意义(P<0.01).病毒感染后72 h,与相应的Lv-NC感染组和细胞对照组比较,Lv-shRNA-CD147感染组HCC70细胞内β-catenin、MMP2、MMP9表达降低,而Bax表达增高,差异均有统计学意义(P<0.01).结论·CD147基因沉默可以抑制三阴性乳腺癌细胞的增殖和迁移.